簡要描述:人眼脈絡黑色素瘤細胞,C918說明書STR檢測發(fā)現,三株人侵襲性脈絡膜黑色素瘤細胞C918、M619和Mum-2B為同一遺傳背景,懷疑存在交叉污染。
詳細介紹
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1. 接收到細胞,肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張)。
2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。
3.嚴格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶。
4.將細胞培養(yǎng)瓶內的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞)。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。
6.1000rpm,5min離心,重懸細胞。
7換新的細胞培養(yǎng)瓶。37℃,5%CO2培養(yǎng)。
C918(人眼脈絡黑色素瘤細胞)圖片復蘇操作要點:
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內,再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內*解凍,使細胞能盡快通過易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內,將管內細胞轉移至準備好的離心管內,輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉移至離心管內。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細胞懸液。
5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內,補加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內培養(yǎng)。
6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續(xù)的實驗。
中國倉鼠肺細胞英文名稱:CHL
Beta-TC-6(小鼠胰島素瘤胰島β細胞)5×106cells/瓶×2
大鼠胃粘膜上細胞*培養(yǎng)基100mL
大鼠子宮平滑肌細胞*培養(yǎng)基100mL
人脈絡膜微血管細胞*培養(yǎng)基100mL
小鼠骨髓瘤淋巴細胞英文名稱:N-H
MLTC-1(小鼠睪間質細胞瘤細胞)5×106cells/瓶×2
NZCYM瓊脂/NZCYM AgarBR100克國產/進口
Hep 3B(人肝細胞)5×106cells/瓶×2
組織金屬蛋白酶抑制因子3(TIMP3)重組蛋白英文名稱:Recombinant Tissue Inhibitors Of Metalloproteinase 3 (TIMP3)
C918(人眼脈絡黑色素瘤細胞)圖片大鼠S100B蛋白(S-100B)ELISA Kit,48T/96T
兔子S100B蛋白(S-100B)ELISA Kit,48T/96T
大鼠S100蛋白(S-100)ELISA Kit,48T/96T
人S100蛋白(S-100)ELISA Kit,48T/96T
小鼠S100蛋白(S-100)ELISA Kit,48T/96T
兔子S100蛋白(S-100)ELISA Kit,48T/96T
人可溶性P選擇素(sP-selectin)ELISA Kit,48T/96T
豬可溶性P選擇素(sP-Selectin)ELISA Kit,48T/96T
小鼠可溶性P選擇素(sP-selectin)ELISA Kit,48T/96T
人眼脈絡黑色素瘤細胞,C918說明書
STR檢測發(fā)現,三株人侵襲性脈絡膜黑色素瘤細胞C918、M619和Mum-2B為同一遺傳背景,懷疑存在交叉污染。
人眼脈絡黑色素瘤細胞,C918說明書
使用權限 A類注意事項:
1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現象,若有上述現象發(fā)生請及時和我們。
2. 仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關信息,如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落,將細胞置于培養(yǎng)箱內靜置培養(yǎng)過夜,隔天再取出觀察。此時多數細胞均會貼壁,若細胞仍不能貼壁請用臺盼藍染色測定細胞活力,如果證實細胞活力正常,請將細胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng);如果染色結果顯示細胞無活力,請拍下照片及時和我們,信息確認后我們?yōu)槟倜赓M寄送一次。
4. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶內多余的培養(yǎng)基可收集備用,細胞傳代時可以一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合,使細胞逐漸適應培養(yǎng)條件;建議直接購買提供的*培養(yǎng)基。
5. 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和技術部溝通交流。
培養(yǎng)溫馨提示:
1)公司努力實現為科學研究提供實驗細胞技術服務。所提供的實驗細胞及其子代,不能用于人體實驗和臨床診斷、治療。
2)公司細胞資源中心承諾盡zui大努力對實驗細胞資源相關信息進行及時更新。但限于我們的技術條件,中心不保證其準確性。
3)從文獻等處引用的信息本中心未進行核實,僅供參考。
注意事項:
1. 收到細胞后,若發(fā)現干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們聯(lián)系。
2. 所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內操作,并請注意防護,所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
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