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巴氏芽孢桿菌(Bacilluspasteurii)產脲酶,尿素酰胺水解酶,近來受到很多研究人員追捧,那如何培養這菌株成了很多大家關注的問題,下面就一一詳細介紹巴氏芽孢桿菌如何培養說明巴氏芽孢桿菌培養溫度:30℃培養時間:18-24小時培養基:.CASOAGAR+尿素(20克/升)酪蛋白胨15克大豆蛋白胨5克氯化鈉5克瓊脂20克蒸餾水1升PH7.3斜面菌種和凍干菌種應在2-8℃保存。凍干活化,干粉要全部用完,不能保留,用0.1-0.2ml的培養液或者無菌水溶解,接種在2支斜面上...
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在整個PCR體系中,引物占有十分重要的地位。PCR的特異性要求引物與靶DNA特異結合,不與其他非目的的DNA結合,PCR的靈敏性要求DNA聚合酶能與引物進行有效的延伸,可見引物設計好壞與PCR結果密切相關。一、PCR引物設計原則1、引物長度一般在15-30bp引物長度一般為15-30bp,常用的為18-27bp,但不應大于38bp,因為過長會導致其延伸溫度大于74℃,不適于TaqDNA聚合酶進行反應;2、引物GC含量一般為40%-60%引物GC含量一般為40%-60%,以45...
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流式結果圖有4種類型,分別為:1.直方圖2.散點圖3.等高線圖4.密度圖下面一一為大家介紹1.直方圖(Histograms)a.橫坐標代表熒光信號或散射光信號相對強度,可以是線性或對數坐標。b.縱坐標一般是相對細胞數。直方圖適用于分析處理周期(如下圖)直方圖分析數據注意事項:①不能比較不同標記之間的表達量。如一號樣本單標記CD133、二號樣本單標記CD44,那么CD133與CD44表達量不能用直方圖進行比較。②直方圖的形狀(直方圖的高度及寬度)取決于儀器的類型、處理軟件和樣本...
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ELISA試劑盒以靈敏度較高、特異性較好的特點在上得到了廣泛的應用,但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。我將操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給同行帶來一些啟發,提高試驗質量。下面分析ELISA試劑盒操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法。目前用于紡織退漿的淀粉酶主要ELISA試劑盒,淀粉糖化酶(β-淀粉酶),胰淀粉酶,麥芽淀粉酶等。我國主要采用耐熱性強的枯草桿菌淀粉酶即α-淀粉酶(枯草桿菌),β淀...
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一、實驗過程中需要注意的問題①蛋白樣品的提取及蛋白含量的檢測蛋白樣品的提取咱們*是按照試劑盒說明書來做的,步驟沒有什么講的,但是因為蛋白樣品的好壞直接決定了是否能做出來蛋白條帶,這就好比蓋房子所需要的磚頭一樣,一定要務必認真。②儀器準備清洗玻璃板:玻璃板的正確拿法應該是拿住玻璃板的左右兩側不要用手拿上下兩端,避免手套上面的臟東西順著水流流到玻璃板上,玻璃板請一定務必清洗干凈,不干凈的玻璃板上面的殘留物可能會影響凝膠之間的化學反應,導致膠出現問題,對后面的結果影響很大。玻璃板放...
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軟瓊脂(softagar)實驗一般用來檢測細胞的集落形成能力。現在這種方法越來越多的用于分離癌細胞,也可以用來確認癌細胞是否具有癌化特性,為進一步做腫瘤小鼠移植模型奠定理論基礎。該方法看似簡單,但如果細節掌握不好,往往導致實驗失敗或數據缺乏說服力。如果你曾經在這個實驗上栽了跟頭,請不妨在如下幾個方面進行嘗試:1.要確保在整個實驗過程中所使用的瓊脂處于*液體狀態(80℃),尤其是在做基底時,如果瓊脂凝固過快會導致基底不均一;2.做瓊脂基底是應避免產生小氣泡,一旦有小氣泡產生,應...
7-30
剛復蘇的細胞狀態不好,有許多死細胞,頻繁換液好嗎?大致如題,有一些人認為細胞剛復蘇不能狗頻繁的換液,說是細胞會自己分泌細胞因子維持自己的生存,換液的話,就會影響細胞的生長,長的不好,但是我的細胞狀態不好而且有很多細胞碎片,細胞死亡之后在培養基中會不會釋放很多的有毒物質,對細胞的生長不利,所以就想要換液把死細胞和細胞碎片都洗掉,目前不知道怎么選擇,所以想請大家給一下就參考意見?能洗掉的就洗,洗不掉的也不用刻意的用力吹,正如你所說的細胞密度小,可能會損害細胞。換液的話還是2~3天...
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基礎篇-無菌操作基本技術1.實驗進行前,無菌室及無菌操作臺(laminarflow)以紫外燈照射30-60分鐘滅菌,以70%ethanol擦拭無菌操作抬面,并開啟無菌操作臺風扇運轉10分鐘后,才開始實驗操作。每次操作只處理一株細胞株,且即使培養基相同亦不共享培養基,以避免失誤混淆或細胞間污染。實驗完畢后,將實驗物品帶出工作臺,以70%ethanol擦拭無菌操作抬面。操作間隔應讓無菌操作臺運轉10分鐘以上后,再進行下一個細胞株之操作。2.無菌操作工作區域應保持清潔及寬敞,必要物...
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