12-11
無論新人還是熟手,細胞污染都是必須要面對的,那對于細胞污染,我覺得zui好的措施就是預防為主,因為細胞一旦污染,想救是非常困難的,即便救活,細胞狀態也會差很多。所以我先來說下我是怎么預防細胞污染的。生物安全柜是處理細胞的主要場所,也是細胞發生污染的主要場所,所以安全柜的正確使用是預防細胞污染的di一步。那么安全柜內需要注意的小細節有哪些呢?首先,所有進入安全柜的東西在進入前都要用75%的酒精消毒。特別要注意的是我們的手,只要出了安全柜,再進入安全柜前都要噴75%的酒精消毒。實...
12-5
一、肉眼觀察以下幾項:1.細胞瓶身:如果瓶身上沒有裂縫,正常;如果瓶身上有裂縫,則污染幾率非常大。2.培養基顏色:如果培養基顏色是紅色或者粉色,正常;如果是橙色,則可能是污染或者細胞過密;如果是黃色,則污染幾率非常大。3.培養基澄清度:如果培養基澄清,正常;如果有少許漂浮物,則可能是污染或者有細胞凋亡;如果培養基很渾濁,甚至出現絮狀物,則污染幾率非常大。二、進行顯微鏡下觀察(通常觀察前需先靜置細胞1-2h)顯微鏡下可以清晰觀察到細胞是否有菌類污染,菌類污染通常分為桿菌、球菌和...
11-19
干粉培養基是供微生物、植物和動物組織生長和維持用的人工配制的養料,一般都含有水、氮源、無機鹽(包括微量元素)、碳源、生長因子(維生素、氨基酸、堿基、抗菌素、色素、激素和血清等)等。干粉培養基由于配制的原料不同,使用要求不同,而貯存保管方面也稍有不同。一般培養基在受熱、吸潮后,易被細菌污染或分解變質,因此一般培養基必須防潮、避光、陰涼處保存。對一些需嚴格滅菌的培養基(如組織培養基),較長時間的貯存,必須放在3-6℃的冰箱內。由于液體培養基不易長期保管,均改制成粉末。干粉培養基若...
11-18
根據賓夕法尼亞大學佩雷??爾曼醫學院的一項新研究,隨著細胞老化,它們排出有害垃圾的能力下降。研究結果表明,老年神經元中自噬的惡化-從未復制過的細胞和它們所居住的尸體一樣古老-可能是一系列神經退行性疾病(如肌萎縮側索硬化癥,阿爾茨海默氏癥)的危險因素,和帕金森氏癥。使用來自年輕和老年小鼠的神經元的活細胞成像,生理學教授ErikaHolzbaur博士和作者,Holzbaur實驗室的博士后研究員AndreaStavoe博士本周在eLife上發表了他們的研究。自噬的重要性在2016年...
10-31
酶聯免疫吸附法(ELISA)由于其易于操作,可以簡單地回答樣本中有多少蛋白質/多肽/抗體這一基本問題,是實驗室比較常用的一種檢測方法。而這種簡單的分析方法的核心,就是標準曲線。沒有它,我們的實驗就變成了一個二元的“是/不是”測試。有了它,我們可以深入研究生物反應的細節。那么,是什么使得標準曲線如此強大呢?讓我們在ELISA的背景來討論這個問題。簡單地說,標準品就是一系列已知目標蛋白數量的陽性對照。例如,如果對人類IgG進行ELISA檢測,標準曲線將包含逐漸減少的已知量的人類I...
10-25
辛辛苦苦提完RNA,逆轉錄后一個個孔加完引物和模板,Z后進行RT-PCR,你以為這樣就可以美滋滋地坐等結果了?等到一幅下面這樣的結果圖,不知道對于剛接觸RT-PCR的你來說內心是否是崩潰的?這是啥?怎么看?別急,讓我慢慢跟你介紹,看完后你就能準確的分析出你的RT-PCR結果了。「這里以7500軟件為例進行介紹」1.首先設置好內參和對照組「在AnalysisSettings處」,一般我們在上機前會對應設置好的,如果設置好的話可以直接跳至第3點。如果沒有設置好的話是需要重新進行設...
10-14
實驗方法原理基本原理類似于DNA的天然復制過程,其特異性依賴于與靶序列兩端互補的寡核苷酸引物。PCR由變性--退火--延伸三個基本反應步驟構成:①模板DNA的變性:模板DNA經加熱至94℃左右一定時間后,使模板DNA雙鏈或經PCR擴增形成的雙鏈DNA解離,使之成為單鏈,以便它與引物結合,為下輪反應做準備;②模板DNA與引物的退火(復性):模板DNA經加熱變性成單鏈后,溫度降至55℃左右,引物與模板DNA單鏈的互補序列配對結合;③引物的延伸:DNA模板--引物結合物在Taq酶的...
9-19
蛋白抗體是什么?蛋白抗體升高是什么原因引起的?專家們給我們做出了介紹:甲狀腺球蛋白(TG)是由甲狀腺濾泡上皮分泌,主要儲存在甲狀腺濾泡腔,是甲狀腺激素合成的場地。在正常情況下有很少量的甲狀腺球蛋白釋放入血,甲狀腺球蛋白正常值蛋白抗體(TGA)的存在。因為甲狀腺結合球蛋白可以影響血清甲狀腺球蛋白的測定。蛋白抗體是自身免疫性甲狀腺疾病病人血清中的一種常見自身抗體。它主要由IgG1、IgG2和IgG4組成,少部分為IgA和IgM。一般認為TGAb對甲狀腺無損傷作用。TGAb與甲狀腺...
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