4-23
溶葡球菌酶(lysozyme)又稱胞壁質酶(muramidase)或N-乙酰胞壁質聚糖水解酶(N-acetylmuramideglycanohydrlase),是一種能水解致病菌中黏多糖的堿性酶。主要通過破壞細胞壁中的N-乙酰胞壁酸和N-乙酰氨基葡糖之間的β-1,4糖苷鍵,使細胞壁不溶性黏多糖分解成可溶性糖肽,導致細胞壁破裂內容物逸出而使細菌溶解。溶菌酶還可與帶負電荷的病毒蛋白直接結合,與DNA、RNA、脫輔基蛋白形成復鹽,使病毒失活。因此,該酶具有抗菌、消炎、抗病毒等作用。...
4-3
RNA甲基化(RNAmethylation)是一類表觀遺傳修飾,在已經發現的超過100種不同的RNA化學修飾中,主要有6-甲基腺嘌呤(N6-methyladenosine,m6A)、5-甲基胞嘧啶(C5-methylcytidine,m5C)和1-甲基腺嘌呤(N1-methyladenosine,m1A)。RNA甲基化在調控基因表達、編輯、穩定性及降解等方面扮演重要角色。早在20世紀70年代,人們已經在真核生物的mRNA和lncRNA中發現了m6A修飾。但受制于技術的局限性,...
3-18
慢病毒包裝簡要程序:以六孔板中的1孔為例,每個樣品需要1×10∧6個293FT細胞。1、取1.5ml滅菌EP管,加入1.5μg包裝混合質粒和0.5μg表達質粒以及250μl的無血清OptiMEM。輕柔混勻,室溫孵育5min。2、取1.5ml滅菌EP管,取9μl脂質體2000l溶于250μl無血清Opti-MEMI培養基中。輕柔混勻,室溫孵育5min。3、將DNA溶液和脂質體溶液輕柔混勻。室溫孵育20min4、用胰酶消化并記數293FT細胞。用含血清的DMEM培養基重懸細胞。5...
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一、自噬誘導劑(1)BredeldinA/Thapsigargin/Tunicamycin:模擬內質網應激(2)Carbamazepine/L-690,330/LithiumChloride(氯化鋰):IMPase抑制劑(即Inositolmonophosphatase,肌醇單磷酸酶)(3)Earle's平衡鹽溶液:制造饑餓(4)N-Acetyl-D-sphingosine(C2-ceramide):ClassIPI3KPathway抑制劑(5)Rapamycin:mTOR抑...
1-8
巴氏芽孢桿菌在水產上也算是用得比較多了,能夠肥水、凈水、降解氨氮、亞鹽等有害物質。這些芽孢的作用大家都清楚,水質惡化、底質惡化等都能使用芽孢來改善,可是你知道為什么這小小的細菌,卻有這么大的用途嗎?其實上面這些用途都是芽孢的一個能力引申出來的——分解。先說肥水,為什么芽孢能肥水?細菌也會在塘里生長,不會搶奪藻類的營養嗎?首先藻類是不能直接利用有機物的,像殘餌、糞便、尸體等都無法成為藻類生長的助力,而芽孢會將有機質分解為無機物,這樣植物就能直接利用這些營養成分了,從而達到肥水的...
12-27
細胞培養中常見的污染情況總結如下:常見的污染如下:1、細菌:細菌在普通倒置顯微鏡下為黑色細沙狀,根據感染細菌的不同,可有不同的外形,培養液一般會渾濁變黃,對細胞生長影響明顯。仔細檢查一下器皿的滅菌情況,是否在高壓滅菌時放氣時間足夠,壓力足夠!尤其是和儲存培養液接觸的移液管等物品,連續兩次污染的話有可能造成儲存液污染,一定要注意!下次使用前檢查一下培養液是否存在渾濁的現象!可在培養液中加相應的抗生素處理2、霉菌:培養液是清亮的,倒置顯微鏡下無雜質,37度孵箱培養2-3天,仍清亮...
12-18
常見菌類污染情況圖片1.桿菌常見的有大腸桿菌,長度通常在2-5um左右。2.球菌常見的有葡萄球菌,直徑通常在1-2um左右。3.霉菌常見的有毛霉,菌絲寬2-10um左右,長度短則幾十um,長則可達幾mm。以上3種是細胞培養過程中常見的菌類污染,其共性是增殖快,適應能力強,很難*,一般如果確認培養細胞有以上污染,建議盡快丟棄,并檢查相關試劑和培養箱是否有污染,確認沒有后再重新復蘇。那么細胞如果還是不幸污染了,那又該怎么辦呢?我把細胞污染分為早期和晚期兩種。早期污染是細胞狀態變差...
12-11
ELISA試劑盒以靈敏度較高、特異性較好的特點在上得到了廣泛的應用,但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。我將操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給同行帶來一些啟發,提高試驗質量。實驗顯示,ELISA試劑盒經過正確處理的熱滅活血清,對大多數的細胞而言是不需要的。經此處理過的血清對細胞的生長只有微小的促進,或*沒有任何作用,甚至通常因為高溫處理影響了血清的質量,而造成細胞生長速率的降低。而經過熱處理的血清,沉淀物...
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